Jessamine County är ett administrativt område i delstaten Kentucky, USA, med 48 586 invånare. Den administrativa huvudorten (county seat) är Nicholasville. Jessamine County ligger i den inre delen av regionen Bluegrass.
Enligt United States Census Bureau har countyt en total area på 452 km². 449 km² av den arean är land och 3 km² är vatten.